Флуоресценциялық микроскопия біздің биологиялық үлгілерді визуализациялау және зерттеу қабілетімізді өзгертті, бұл бізге жасушалар мен молекулалардың күрделі әлеміне енуге мүмкіндік берді. Флуоресцентті микроскопияның негізгі құрамдас бөлігі үлгідегі флуоресцентті молекулаларды қоздыру үшін қолданылатын жарық көзі болып табылады. Көптеген жылдар бойы әртүрлі жарық көздері қолданылды, олардың әрқайсысы өзінің бірегей сипаттамалары мен артықшылықтары бар.
1. Сынап шамы
50-ден 200 ваттқа дейінгі жоғары қысымды сынап шамы кварц әйнегінен жасалған және пішіні сфералық. Оның ішінде сынаптың белгілі бір мөлшері бар. Ол жұмыс істеген кезде екі электрод арасында разряд пайда болады, бұл сынаптың булануын тудырады және сферадағы ішкі қысым тез артады. Бұл процесс әдетте шамамен 5-15 минутты алады.
Жоғары қысымды сынап шамының сәулеленуі электродты разрядтау кезінде сынап молекулаларының ыдырауы мен тотықсыздануы нәтижесінде жарық фотондарының шығарылуына әкеледі.
Ол күшті ультракүлгін және көк-күлгін сәулелерді шығарады, бұл оны әртүрлі флуоресцентті материалдар үшін қолайлы етеді, сондықтан флуоресцентті микроскопияда кеңінен қолданылады.
2. Ксенонды шамдар
Флуоресцентті микроскопияда жиі қолданылатын тағы бір ақ жарық көзі ксенон шамы болып табылады. Ксенон шамдары, сынапты шамдар сияқты, ультракүлгіннен жақын инфрақызылға дейінгі толқын ұзындығының кең спектрін қамтамасыз етеді. Бірақ олар қозу спектрлерімен ерекшеленеді.
Сынап лампалары өздерінің сәулеленуін жақын ультракүлгін, көк және жасыл аймақтарда шоғырландырады, бұл жарқын флуоресцентті сигналдардың пайда болуын қамтамасыз етеді, бірақ күшті фотоуыттылықпен бірге келеді. Демек, HBO шамдары әдетте тіркелген үлгілер немесе әлсіз флуоресцентті бейнелеу үшін сақталады. Керісінше, ксенон шамдарының көздері әртүрлі толқын ұзындықтарында қарқындылықты салыстыруға мүмкіндік беретін тегіс қозу профиліне ие. Бұл сипаттама кальций иондарының концентрациясын өлшеу сияқты қолданбалар үшін тиімді. Ксенон шамдары жақын инфрақызыл диапазонда, әсіресе 800-1000 нм шамасында күшті қозуды көрсетеді.
XBO шамдарының HBO шамдарына қарағанда келесі артықшылықтары бар:
① Біркелкі спектрлік қарқындылық
② Инфрақызыл және орта инфрақызыл аймақтарда күштірек спектрлік қарқындылық
③ Объект саңылауына жетуді жеңілдететін үлкен энергия шығысы.
3. Жарықдиодты шамдар
Соңғы жылдары флуоресцентті микроскопиялық жарық көздері саласында жаңа үміткер пайда болды: жарықдиодты шамдар. Жарық диодты шамдар миллисекундтарда жылдам қосу-өшіру артықшылығын ұсынады, үлгі экспозиция уақытын қысқартады және нәзік үлгілердің қызмет ету мерзімін ұзартады. Сонымен қатар, жарықдиодты жарық тез және дәл ыдырауды көрсетеді, бұл ұзақ мерзімді тірі жасуша эксперименттері кезінде фотоуыттылықты айтарлықтай төмендетеді.
Ақ жарық көздерімен салыстырғанда, жарық диодтары әдетте тар қозу спектрінде шығарады. Дегенмен, көптеген жарықдиодты диапазондар бар, бұл жан-жақты көп түсті флуоресценция қолданбаларына мүмкіндік береді, бұл жарықдиодтарды заманауи флуоресцентті микроскопия қондырғыларында танымал таңдауға айналдырады.
4. Лазерлік жарық көзі
Лазерлік жарық көздері жоғары монохроматикалық және бағытты болып табылады, бұл оларды жоғары ажыратымдылықтағы микроскопия үшін өте қолайлы етеді, соның ішінде STED (стимулданған сәулеленудің азаюы) және PALM (фотоактивтендірілген локализация микроскопиясы) сияқты аса ажыратымдылық әдістері. Лазерлік жарық әдетте флуоресцентті қозуда жоғары селективтілік пен дәлдікті қамтамасыз ететін мақсатты флюорофор үшін қажетті қозу толқынының нақты ұзындығына сәйкес келетін етіп таңдалады.
Флуоресцентті микроскоптың жарық көзін таңдау арнайы эксперименттік талаптарға және үлгі сипаттамаларына байланысты. Егер сізге қандай да бір көмек қажет болса, бізге хабарласыңыз
Жіберу уақыты: 13 қыркүйек 2023 ж