Флуоресцентті микроскоп үлгіні жарықтандыру және үлгідегі фторхромдарды қоздыру үшін жоғары қарқынды жарық көзін пайдаланатын оптикалық микроскоптың бір түрі болып табылады. Үлгіні жарықтандыру әдетте ультракүлгін сәуле шығаратын жарық көзімен жүзеге асырылады. Олар биологиялық, медициналық және өндірістік салаларда кеңінен қолданылады.
Флуоресцентті микроскоп қалай жұмыс істейді?
Флуоресцентті микроскоп ультракүлгін сәуле шығару үшін сынап немесе ксенон шамын пайдаланады. Жарық микроскопқа түседі және дихрикалық айнаға түседі - толқын ұзындығының бір диапазонын көрсететін және басқа диапазон арқылы өтуге мүмкіндік беретін айна. Дихрикалық айна ультракүлгін сәулені үлгіге дейін көрсетеді. Кейбір үлгілер ультракүлгін сәулелер астында табиғи түрде флуоресцентті болады, өйткені олардың құрамында хлорофилл сияқты флуоресцентті заттар бар. Қаралатын үлгі табиғи түрде флуоресцентті болмаса, оны флуорохромдар деп аталатын флуоресцентті бояулармен бояуға болады.
Флуоресцентті микроскоп неден тұрады?
1. Жарық көзі
Ең көп таралған жарық көздері - сынап, ксенон және жарықдиодты шамдар. Меркурий флуоресцентті микроскоп үшін жарықтың ең жақсы сапасын қамтамасыз етеді. Жарықдиодты шамдар танымал бола бастады, өйткені олар басқа көздерге қарағанда арзанырақ және олар аз қуат тұтынады.
| Меркурий шамы | Ксенон шамы | Жарық диодты индикатор | |
| Шығарылатын жарықтың толқын ұзындығы | 350-370 нм | 400нм～ 450нм | 400-700 нм |
| Өмір уақыты (сағат) | 200-300 | 400-600 | 10000 |
| Артықшылық | 1. Жоғары қарқынды жарық, ең көп таралған жарық көздері. 2. Ол флюорофорлардың барлық түрлерін қоздыру үшін күшті ультракүлгін және көк-күлгін сәулелерді шығарады. 3. Жарқын және түрлі-түсті кескіндер. | 1. Спектрлік қарқындылық тұрақты. 2. Инфрақызыл және орта инфрақызылдағы күшті спектрлік қарқындылық. | 1. Ауыстыру оңай. 2. Жылытудың қажеті жоқ. 3. Бірден қосуға және өшіруге болады. 4. Жарық көзінің қарқындылығын бақылау. |
| Кемшілігі | 1. Қысқа өмір. 2. Ұзақ қыздыру уақыты. | 1. Артық қызу үшін арнайы төмен вольтты тұрақты ток қорабы қажет. 2. Меркурий шамына қарағанда қымбатырақ | 1. Ультракүлгін сәуле сынап шамынан әлсіз. 2. Жарықтың әрбір толқын ұзындығы олар шығаратын тар өткізу қабілеттілігіне байланысты бөлек жарықдиодты қажет етеді. |
Сынапты флуоресцентті қондырма
Жарықдиодты флуоресцентті қондырма
2. Қозу сүзгісі
Қозу сүзгісі флуоресцентті микроскоптың жұмысы үшін өте маңызды. Ол флуоресцентті бояу сіңіре алатын қысқа толқын ұзындығының сәулесін өткізеді. Сондай-ақ, ол қызықты жарықтың басқа көздерін блоктайды.
Қозу сүзгісі(B,G,U,V)
3. Дихрикалық айна
Дихройлы айна - басқаларын жіберген кезде белгілі бір толқын ұзындығында жарықты көрсететін оптикалық сүзгі түрі. Ол қозу мен эмиссия толқын ұзындығын бөлу үшін флуоресцентті микроскоптарда қолданылады.
4. Эмиссия сүзгісі
Эмиссия сүзгісі флюорофор шығаратын толқын ұзындықтарын ғана өткізеді және осы диапазоннан тыс барлық қажетсіз жарықты, әсіресе қозу толқын ұзындығын блоктайды.
5. Флуоресцентті бояғыштар
Флуоресцентті бояғыштар флуоресценция қасиетіне ие органикалық қосылыстар болып табылады, олар жоғары жарықтандыратын ультракүлгін сәулемен қозудан кейін жоғары контрастты көрінетін жасыл жарық шығару арқылы флуоресцентті кескінді құра алады. Жиі қолданылатын флуоресцентті бояғыштар; DAPI (49,6-диамидино-2-фенилиндол), акридин апельсин, аурамин-родамин, Alexa Fluors немесе DyLight 488.
Флуоресцентті микроскоптардың неше түрі бар?
1. Тік эпифлуоресцентті микроскоп:
Бұл флуоресцентті микроскоптың ең көп таралған түрі. Флюорофорды қозу және флуоресценцияны анықтау бірдей жарық жолы арқылы (яғни объектив арқылы) жүзеге асырылады. Флуоресцентті микроскоптардың көпшілігі, әсіресе өмір туралы ғылымдарда қолданылатындар, эпифлуоресценциялық дизайнға жатады.
BS-2081F зерттеу флуоресцентті биологиялық микроскоп
2. Конфокальды флуоресцентті микроскоп:
Конфокальды флуоресцентті микроскоп: флуоресцентті микроскоптың бұл түрі кескінді жасау үшін лазерлік сканерлеуді флуоресцентті жарықтандырумен біріктіреді. Оны жасушалар мен тіндерді зерттеу, ақуыздар мен жасушалардағы басқа заттарды анықтау және материалдардың қалыңдығын өлшеу сияқты кең ауқымда қолдануға болады.
BS-2081F зерттеу флуоресцентті биологиялық микроскоп
3. Төңкерілген флуоресцентті микроскоп
Мұндай микроскоптың жарық көзі мен конденсаторы үстіңгі жағында, төмен қаратып орналасқан. Жарықтандыру бұрышы зерттелетін үлгінің бетіне қатысты 90 градус болуы керек.
BS-2095F инверттелген флуоресцентті микроскоп
Флуоресцентті микроскоптардың артықшылықтары мен кемшіліктері қандай?
Артықшылықтары:
- Тірі ағзалардағы жасушаларды зақымдамай бақылауға мүмкіндік береді
- Дәл түстермен жоғары ажыратымдылықтағы кескіндерді қамтамасыз етеді
- Жасушалардағы тірі процестерді зерттеуге мүмкіндік береді
- Белоктар немесе нуклеин қышқылдары сияқты жасушалардың ішіндегі молекулалардың әртүрлі түрлерін анықтау үшін қолданылады.
Кемшіліктері:
- Бұл тек флуоресцентті бояумен белгіленген ұяшық ішіндегі белгілі бір құрылымдарды байқауға мүмкіндік береді.
-Флуоресцентті бояғыштардың реактивті молекулаларына флуоресценция процесінде электрондардың қозуынан болатын фотоағарту әсер етуі мүмкін. Нәтижесінде реактивті бояғыштар флуоресценттік сәуле шығару қарқындылығының химиялық қасиетін жоғалтуы мүмкін.
-Клеткалар флуоресцентті бояғыштармен бояғаннан кейін фототоксикалық әсерге бейім, өйткені флюорофор молекулалары қысқа толқынды жарықтан жоғары энергиялы фотондарды сіңіреді.
Флуоресцентті микроскоптың қолданылуы қандай?
Флуоресцентті микроскоптар биохимия, жасуша биологиясы, микробиология, иммунология және медицина сияқты әртүрлі зерттеулер мен қолдану салаларында кеңінен қолданылады.
1. Биология саласында флуоресцентті микроскоп флуоресцентті бояу таңбалауының көмегімен жасушалық және субмикроскопиялық жасушалық компоненттер мен әрекеттерді дәл және егжей-тегжейлі анықтауға мүмкіндік береді.
2. Медицина саласында флуоресцентті микроскоп флуоресцентті реагенттерді бактериялар мен вирустардың болуын және таралуын анықтау үшін немесе хирургиялық операцияны жеңілдету үшін хирургиялық мақсаттарды белгілеуге көмектесе алады.
3. Минералогия саласында флуоресценциялық микроскоп көбінесе асфальт, мұнай, көмір, графен оксиді және басқа минералдар сияқты өздігінен флуоресценциялық қасиеттері бар заттарды зерттеу үшін қолданылады.
4. Материалтануда флуоресцентті микроскопты талшық негізіндегі материалдарды талдау үшін тоқыма өнеркәсібінде немесе қағаз өнеркәсібінде пайдалануға болады.
Хабарлама уақыты: 14 наурыз 2023 ж